随着社会经济的葡萄发展，生活方式的籽维中原显著改变，人们对养生保健的生素素和素E速测关注度逐渐增加，促使我国保健品市场迅速发展。胶囊原花青素和维生素E均具有抗氧化活性，花青有助于防止细胞老化、维生抵御自由基损害，快定还可帮助防止血液细胞受损，葡萄预防女性经常性或自然流产，籽维中原因此此类具有抗氧化功能的生素素和素E速测保健品成为市场新宠，此类产品的胶囊需求量和销售额增长速度也最快。

市场上此类保健品种类繁多，花青消费者难辨优劣，维生需要建立规范的快定质量标准对其进行质量控制。原花青素和维生素E是葡萄葡萄籽维生素E软胶囊的两个重要指标，建立检测该组分的方法对葡萄籽维生素E软胶囊的质量控制极其重要。原花青素是从植物中分离而来的多羟基黄烷一3一醇单元构成的多酚化合物总称，该化合物有较强的抗氧化和清除自由基的能力，葡萄籽是其重要来源，其次广泛分布于葡萄、樱桃、蓝莓、李子中。目前，测定原花青素的方法主要有紫外或可见分光光度法、液相色谱法、薄层层析法、化学振荡法等。其中分光光度法操作简单、检测成本相对较低，但样品处理较为耗时，正丁醇一盐酸比色法需要在沸水浴中显色反应40min，香草酸一盐酸比色法需要避光反应15h，实验时间较长。

研究表明，维生素E含量测定主要分析方法有气相色谱法、气相色谱一质谱联用法、高效液相色谱法、液相色谱一串联质谱结合同位素稀释法、分光光度法、化学发光抑制法和荧光法等。在这些方法中，分光光度法和荧光法易受到处方中其他成分的干扰，化学发光法要求特殊仪器，液相色谱一串联质谱结合同位素稀释法需使用自身同位素内标进行定量；食品中的维生素E含量测定可参照国标方法GB5009.82进行，该法样品前处理较繁琐，增加了维生素E被氧化的风险；《中华人民共和国药典》2015年版采用气相色谱法，检测过程中还需添加内标计算校正因子，气相色谱一质谱法需要将气相色谱仪与质谱仪联用，不仅样品前处理复杂，且仪器费用高，为生产企业带来较高的检测成本。

本文采用高效液相色谱法，可同时测定葡萄籽维生素E软胶囊中原花青素和维生素E的含量，建立了一种操作简便、结果准确、快速经济的含量测定方法，显著缩短了检验周期。

一、材料与方法

1、仪器、试剂与材料

Agilent1260型高效液相色谱仪（配备DAD紫外检测器）：安捷伦科技有限公司；FA25型剪切分散乳化机：上海氟鲁克流体机械制造有限公司；MSA225S一1CE—DU型电子天平：德国赛多利斯公司；ALl04型电子天平：瑞士梅特勒～托利多集团；TD5102型电子天平：余姚市金诺天平仪器有限公司；UV一2450型紫外分光光度计：日本岛津公司；DKZ一2型电热恒温振荡水槽：杭州哈析仪器仪表有限公司；KQ一250DB型超声波清洗器：昆山市超声仪器有限公司；R206B型旋转蒸发仪：上海申生科技有限公司；Milli—QA10型纯水机：美国密理博中国有限公司。
原花青素标准品（98.0％）：上海哈灵生物科技有限公司；维生素E醋酸酯标准品（99.5％）：

国SupeIco公司；α-生育酚标准品（98.9％）：Dr．EhrenstomrGmbH公司；葡萄籽维生素E软胶囊（批号20190115、20190116、20190117）：浙江康恩贝集团医疗保健品有限公司；大豆油（批号JA2018/06/28/CN）：山东鲁花集团有限公司；蜂蜡：郑州康源化工产品有限公司；甲醇（色谱纯）：德国默克公司；无水乙醇（色谱纯）：天津海普瑞精细化工有限公司；L（+）-抗坏血酸、氢氧化钾、乙醚、石油醚（沸程30～60℃）、无水硫酸钠（均为分析纯）：永华化学科技有限公司。

2、方法

（1）样品处理

精密称取葡萄籽维生素E软胶囊（批号20190115）内容物0.1g于25mL烧杯中，加入10mL甲醇，置于70℃水浴中加热，振摇使内容物分散，立即转移至25mL容量瓶中，再用10mL甲醇分三次洗涤烧杯，洗涤液转入容量瓶，超声提取20min，取出，冷却至室温，用甲醇定容至刻度，摇匀，经0.22μm微孔滤膜过滤，作为供试品溶液。将上述溶液注入液相色谱仪，记录色谱图（见图1）。

（2）对照品溶液的制备

精密称取105℃干燥至恒重的原花青素对照品28.63mg和维生素E醋酸酯对照品12.42mg于同一个10mL容量瓶中，加适量甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得到混合对照品贮备液。该贮备液避光保存。将该贮备液按一定比例稀释后进样分析，其液相色谱图见图1。

（3）阴性对照溶液制备

按配方比例称取大豆油、蜂蜡，混匀，将其加热至70℃，熔化，搅拌均匀，制得阴性对照样品。按“1.2.1”方法制备阴性对照溶液，进样并记录液相色谱图（见图1），用于专属性研究。

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